“粗枝云杉体细胞胚胎发生与植株再生方法”获国家发明专利授权
信息来源：中国林业网 发布日期：2015-11-12 浏览次数：3765次
中国林业网11月12日讯 近日，从国家知识产权局获悉，由中国林科院林业所、林木遗传育种国家重点实验室王军辉研究员课题组主持完成的“粗枝云杉体细胞胚胎发生与植株再生方法”获得国家发明专利授权。
粗枝云杉（Picea asperata. Mast）即国内俗称的云杉，我国特有种、也是国内分布最广的云杉属树种、木材性质优良、是其主要分布区川西高原、甘肃南部和山西西南部的主要造林树种和建群种。体细胞胚胎发生技术作为一种针叶树种最具潜力的无性繁殖技术，目前，在粗枝云杉繁殖方面尚属空白。
该发明以粗枝云杉未成熟合子胚为诱导材料，建立了粗枝云杉体细胞胚胎发生和植株再生过程中的全套技术体系：（1）未成熟合子胚在每年的6月中旬到7月上旬最有利于胚性愈伤组织的诱导，采用1/2 LM基本培养基，胚性愈伤组织诱导率平均达到64.22%，最高达到93.33%，该诱导频率远远高于国内同类树种报道的平均30%左右的水平。（2）通过对影响胚性愈伤组织增殖条件的筛选，分别建立粗枝云杉胚性愈伤组织的半固体和液体悬浮增殖体系；增殖2周后，胚性愈伤组织增殖量分别增加1.2倍和4.5倍，不仅极大提高了胚性愈伤组织的增殖效率，还保证了愈伤组织的高度均一性，为随后体细胞胚的高同步化分化奠定了基础。（3）采用正交试验设计和随机区组设计相结合的方法，确定了粗枝云杉体细胞胚稳定、高诱导频率和高同步化的分化配方；平均每克鲜重的胚性愈伤组织可以分化产生发育完整的体细胞胚100个以上，最高达到500个以上，远远高出国内同类研究中的平均为20个左右的报道。（4）建立了粗枝云杉体细胞胚高萌发频率方案；采用1/4 LM基本培养基，萌发率平均达到50%左右，基本满足了体胚萌发的需要，结合适当的干化处理技术，萌发率达到80%以上。
该研究成果历时三年，不仅获得了“粗枝云杉体细胞胚胎发生与植株再生方法”全套稳定的技术体系，还获得了一大批高胚性诱导能力的细胞系，为后续开展以粗枝云杉为代表的云杉属树种的基础研究提供了大量珍贵材料。该研究获国家“十二五”科技支撑计划课题“北方针叶树种高世代育种技术研究与示范”的资助。
粗枝云杉（Picea asperata. Mast）即国内俗称的云杉，我国特有种、也是国内分布最广的云杉属树种、木材性质优良、是其主要分布区川西高原、甘肃南部和山西西南部的主要造林树种和建群种。体细胞胚胎发生技术作为一种针叶树种最具潜力的无性繁殖技术，目前，在粗枝云杉繁殖方面尚属空白。
该发明以粗枝云杉未成熟合子胚为诱导材料，建立了粗枝云杉体细胞胚胎发生和植株再生过程中的全套技术体系：（1）未成熟合子胚在每年的6月中旬到7月上旬最有利于胚性愈伤组织的诱导，采用1/2 LM基本培养基，胚性愈伤组织诱导率平均达到64.22%，最高达到93.33%，该诱导频率远远高于国内同类树种报道的平均30%左右的水平。（2）通过对影响胚性愈伤组织增殖条件的筛选，分别建立粗枝云杉胚性愈伤组织的半固体和液体悬浮增殖体系；增殖2周后，胚性愈伤组织增殖量分别增加1.2倍和4.5倍，不仅极大提高了胚性愈伤组织的增殖效率，还保证了愈伤组织的高度均一性，为随后体细胞胚的高同步化分化奠定了基础。（3）采用正交试验设计和随机区组设计相结合的方法，确定了粗枝云杉体细胞胚稳定、高诱导频率和高同步化的分化配方；平均每克鲜重的胚性愈伤组织可以分化产生发育完整的体细胞胚100个以上，最高达到500个以上，远远高出国内同类研究中的平均为20个左右的报道。（4）建立了粗枝云杉体细胞胚高萌发频率方案；采用1/4 LM基本培养基，萌发率平均达到50%左右，基本满足了体胚萌发的需要，结合适当的干化处理技术，萌发率达到80%以上。
该研究成果历时三年，不仅获得了“粗枝云杉体细胞胚胎发生与植株再生方法”全套稳定的技术体系，还获得了一大批高胚性诱导能力的细胞系，为后续开展以粗枝云杉为代表的云杉属树种的基础研究提供了大量珍贵材料。该研究获国家“十二五”科技支撑计划课题“北方针叶树种高世代育种技术研究与示范”的资助。
